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集中空调通风系统冷却水、冷凝水中嗜肺军团菌检测方法

来源:帆宇检测    时间:2021-09-09


  集中空调通风系统冷却水、冷凝水中嗜肺军团菌检测方法:培养法,定性测定集中空调通风系统冷却水、冷凝水及其形成的沉积物、软泥等样品中的嗜肺军团菌,其他洗浴水、温泉水、景观水等样品中的嗜肺军团菌测定可参照执行。
  检测原理:样品经培养在GVPC琼脂平板上生成典型菌落,并在BCYE琼脂平板上生长而在BCYE-CYE琼脂平板不生长,进一步经生化实验和血清学实验鉴定确认的菌落为嗜肺军团菌。
  采样:
  1、将釆样广口瓶用前灭菌。
  2、每瓶中加入Na2S2O3(c=0.1 mol/L)0.3 mL〜0.5 mL,中和样品中的氧化物。
  3、水样采集位置:冷却水釆样点设置在距塔壁20 cm、液面下10 cm处,冷凝水采样点设置在排水管或冷凝水盘处。
  4、每个釆样点依无菌操作取水样约500 mL。
  5、采集的样品2 d内送达实验室,不必冷冻,但要避光和防止受热,室温下贮存不应超过15 d。
  检验步骤:
  1、样品的沉淀或离心:如有杂质可静置沉淀或1 000 r/min离心1 min去除。
  2、样品的过滤:将经沉淀或离心的样品通过滤膜过滤,取下滤膜置于15 mL灭菌水中,充分洗脱,备用。
  3、样品的热处理:取1 mL洗脱样品,置50°C水浴加热30 min。
  4、样品的酸处理:取5 mL洗脱样品,调pH至2.2,轻轻摇匀,放置5 min。
  5、样品的接种:取洗脱样品、热处理样品及酸处理样品各0.1 mL,分别接种GVPC平板。
  6、样品的培养:将接种平板静置于CO₂培养箱中,温度为35笆〜37°C,CO₂浓度为2.5%。无CO₂培养箱可釆用烛缸培养法。观察到有培养物生成时,反转平板,孵育10 d,注意保湿。
  7、菌落观察:军团菌生长缓慢,易被其他菌掩盖,从孵育第3 d开始每天在显微镜观察。军团菌的菌落颜色多样,通常呈白色、灰色、蓝色或紫色,也能显深褐色、灰绿色、深红色;菌落整齐,表面光滑,呈典型毛玻璃状,在紫外灯下,部分菌落有荧光。
  8、菌落验证:从平皿上挑取2个可疑菌落,接种BCYE琼脂平板和BCYE-CYE琼脂平板,35°C〜37°C培养2 d,凡在BCYE琼脂平板上生长而在BCYE-CYE琼脂平板上不生长的则为军团菌菌落。
  9、菌型确定:应进行生化培养与血清学实验确定嗜肺军团菌。生化培养:氧化酶(一/弱+),硝酸盐还原(一),尿素酶(一),明胶液化(+),水解马尿酸。血清学实验:用嗜肺军团菌诊断血清进行分型。
  以上就是集中空调通风系统冷却水、冷凝水中嗜肺军团菌检测方法,帆宇检测具有公共场所集中空调通风系统检测资质,出具CMA资质卫生检测报告。